以异源四倍体体细胞杂种为父本杂交培育三倍体柑桔植株的研究

以 3个柑桔原生质体融合而来的四倍体体细胞杂种为父本 ,与二倍体单胚性种柚子 (Citrusgrandis)以及单多胚混合型品种“华农本地早”桔 (C.reticulata)有性杂交 ,授粉后 90 d,发现种子干瘪 ,大部分种子的胚败育。将干瘪种子在 MT附加 1mg/L GA3 或 50 0 mg/L麦芽浸出物的培养基中 ,经培养抢救 ,有 2 5.6%的种子萌发成苗或继续进行胚的生长 ,后者进一步诱导能形成丛芽 ,经试管嫁接或诱导生根形成完整植株。共获得 6个组合 73棵完整植株 ,染色体数检查表明 ,2 0株为三倍体 (2 n=3x=2 7) ,32株为二倍体 (2 n=2 x=18) ,8株为非整倍体 ,其它 13株还有待于进一步检查。     

内源植物激素与光敏核不育水稻农垦58S育性的关系

采用气相色谱－质谱联用选择离子检测（ＧＣ－ＭＳ－ＳＩＭ）技术,定性、定量分析了光敏核不育水稻农垦５８Ｓ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｊａｐｏｎｉｃａ）及对照品种“农垦５８”在长（ＬＤ）、短（ＳＤ）日照处理下,不同发育时期顶端全展叶片中内源ＩＡＡ、ＡＢＡ 和生殖器官中内源ＩＡＡ、ＡＢＡ、ＧＡ１、ＧＡ４ 的含量变化。实验结果表明：在ＬＤ 处理下,农垦５８Ｓ雌雄蕊形成期的叶片和花粉母细胞形成期的幼穗中ＩＡＡ 相继发生亏缺;农垦５８Ｓ－ＬＤ花粉母细胞形成期、单核期和扬花期,生殖器官中内源ＡＢＡ 均低于农垦５８Ｓ－ＳＤ 的含量,“农垦５８”则与此相反;扬花期不育花药中内源ＧＡ１ 和ＧＡ４ 含量剧减。据此认为：生殖器官中早期ＩＡＡ 的亏损、ＡＢＡ 含量剧减伴随着抗逆性能的减弱及ＧＡＳ的不足共同导致了农垦５８Ｓ的雄性败育     

棕色固氮菌缺失nifZ基因的突变种固氮酶MoFe蛋白的纯化和性质

采用 52℃下加热 6 min,后经 DEAE- 52、Sephacryls S- 2 0 0和 Q- Sepharose等柱层析方法 ,分离纯化了棕色固氮菌 (Azotobacter vinelandii)缺失 nif Z基因突变种固氮酶 Mo Fe(Δnif Z Mo Fe)蛋白 ,其纯度达到电泳纯。Δnif Z Mo Fe蛋白的固氮活性为 2 83nmol C2 H2 还原 / (min·mg蛋白 ) ,远低于野生种 Mo Fe蛋白。Δnif Z Mo Fe蛋白对氧更敏感 ;热稳定性略低于野生种。Δnif Z Mo Fe蛋白的可见光吸收光谱与野生种 Mo Fe蛋白极为相似。其圆二色谱和磁圆二色谱在 450～ 550 nm与野生种 Mo Fe蛋白显著不同 ,表明其 P- cluster及其周围环境与野生种 Mo Fe蛋白有所差异。这亦可能是造成缺失 nif Z突变种 Mo Fe蛋白固氮活性低的原因。     

细小病毒非结构蛋白转基因小鼠模型建立

将小鼠乳腺癌病毒启动子控制的细小病毒非结构蛋白基因(长5.7kb)氯化铯超速离心,纯化透析后用显微注射法导入C57BL/SJL F_1小鼠受精卵雄核,植入假孕母鼠输卵管,得成活小鼠15只。抽取鼠尾DNA,对其中10只小鼠作PCR和southern blot鉴定,其中4只(40％)整合有目的基因。对首建者B_6()的8只子代小鼠鉴定,3只(37.5％)整合有目的基因。说明导入的目的基因能传代。     

鲇鱼成鱼和幼鱼中含色素的巨噬细胞集结的诱导发生

通过腹腔注射不同剂量的牛血清白蛋白（ＢＳＡ）或墨汁以刺激巨噬细胞活动,研究了鲇鱼成鱼和幼鱼头肾、肾、脾和肝中含色素的巨噬细胞集结（ＰＭＡ）的发生。鲇鱼淋巴样组织中存在巨噬细胞的不均一性,可分网状／纤维状巨噬细胞,梭状巨噬细胞,圆形红色巨噬细胞,圆形黄红色巨噬细胞和含色素的巨噬细胞。注射ＢＳＡ或墨汁后,头肾、肾,脾和肝中ＰＭＡ和圆形巨噬细胞的数量最终均有不同程度的增加。通过诱导发生实验,表明含色素的     

黑曲霉糖化酶高产和低产菌株糖化酶基因调控区的克隆及其分析比较

以PCR合成的糖化酶高产菌株黑曲霉(Asp. Niger)T21糖化酶基因5’近端非编码区588bp(EcoRI-BamHI)的序列为探针,从T21染色体DNA中克隆到近2.0kb的糖化酶基因5’端非编码区序列,并以此序列为探针从糖化酶低产菌株黑曲霉3.795(T21的诱变出发株)的染色体DNA中克隆到1.5kb的糖化酶基因5’端非编码区序列。该二序列的分析测定结果表明,其结构特征与文献报道的黑曲霉糖化酶基因5’端非编码区的基本一致,被称为“核心启动子”(Core promoter)的TATAAAT框及GCAAT框,分别在翻译起始点的-109bp及-178bp处。此外,在曲霉amdS,amyB基因中已发现有调控功能的CCAAT序列存在于-449bp和-799bp处。高产和低产菌株糖化酶基因5’端非编码区序列的分析比较结果表明,有9个部位的碱基发生了变化。此实验结果为进一步研究黑曲霉糖化酶基因在转录水平上的调控规律打下了基础。     

水解淀粉的酿酒酵母菌的构建

把黑曲霉糖化酶cDNA,酵母磷酸甘油激酶基因启动子区和终止区以及酵母Ty因子的δ序列构建成整合型的糖化酶表达分泌质粒pKG 1。该质粒转化酿酒酵母Y33得到整合型转化子。转化子分泌糖化酶活力在3.0μ/ml以上,在以5％可溶性淀粉为碳源的培养基中静止培养7d,淀粉利用率达86％,生成酒精的浓度与以5％葡萄糖为碳源时相等。     

A novel centrifugal impeller bioreactor. II. Oxygen transfer and power consumption

The effects of the impeller configuration, aeration rate, and agitation speed on oxygen transfer coefficient K(L)a were studied in a newly designed centrifugal impeller bioreactor (5-L). The oxygen transfer rates in the novel bioreactor were also compared with those in a cell-lift bioreactor with comparable dimensions. The cell-lift impeller produced much higher surface oxygen transfer rates than the centrifugal one at an agitation speed over 200 rpm. This result was in good agreement with our observation that the cell-lift impeller produced much higher unfavorable turbulence. In addition, the experiments using granulated agar particles as pseudo plant cells indicated that the K(L)a value decreased steadily with an increase in agar particle concentration, and the centrifugal impeller still demonstrated a larger K(L)a than the cell lift up to a high pseudo cell concentration of 19.5 g dry weight (DW)/L (under 150 rpm and 0.20 vvm) or 22.3 g DW/L (under 200 rpm and 0.20 vvm). Furthermore, the correlation between power number and impeller Reynolds number for both the centrifugal and the cell-lift impellers was successfully obtained, which could be used for predicting the power input required by each impeller. From the results obtained, the centrifugal impeller bioreactor is expected to have great potential in its application to shear-sensitive biological systems.     

罗伦隐球酵母胞外多糖的研究 Ⅰ.发酵条件

研究了罗伦隐球酵母(cryptococcus laurentii)产生胞外多糖的适宜条件。培养基组成(g/L):葡萄糖80.00,酵母膏1.25,KH_2PO_3.00,MgSO_4·7H_2O0.05,CaCO_3 10.00,pH6.0。在30℃,旋转式摇床(200r/min)上培养6天。胞外多糖产量最高可达17.38g/L,对底物的转化率为21.725％。     

促葡萄糖转运蛋白基因家族的分子进化研究

葡萄糖转运蛋白是一个在结构上相似功能上不同的多基因家族（ＧＬＵＴ１－ＧＬＵＴ５）。由于这一组蛋白和体内的葡萄糖利用有关,因此被认为是糖尿病胰岛素抵抗（抗性）的一个候选基因。本文比较了不同种生物这一基因家族的氨基酸和核苷酸顺序;推测了亲水性和疏水性分布;计算了蛋白质和核苷酸的进化距离,并在此基础上构建了分子进化树。研究表明：这一基因家族具有高度的同源性、极为相似的亲水性和疏水性分布以及结构的对称性。提示这一基因家族起源于一个共同的祖先并可能通过基因的重复而形成。这一进化机制可能有利于氨基酸结构的稳定及抵抗突变的作用。由于邻元法构建的进化树其分支长度存在差异,提示在这一基因家族的进化过程中,各分支上的进化速率并不相同。蛋白质进化距离和核苷酸进化距离所构建进化树的差异提示了在基因组中可能存在隐匿替换。两种方法构建的进化树都提示了ＧＬＵＴ１、３、４在结构和功能上要更为保守。